Prawidłowe pobieranie wymazów na grypę – krok po kroku

Prawidłowe pobranie, przechowywanie i transport próbek oddechowych stanowi kluczowy etap w laboratoryjnym wykrywaniu infekcji wirusem grypy. Jakość próbki ma bezpośredni wpływ na skuteczność diagnostyki – nawet najdokładniejsze testy molekularne mogą dać fałszywie ujemne wyniki, jeśli próbka została nieprawidłowo pobrana lub przechowywana1.

Rodzaje próbek diagnostycznych

Do diagnostyki grypy najczęściej wykorzystuje się próbki z układu oddechowego, przy czym wymazy z nosogardła (NPS) lub z gardła (OPS) pobierane za pomocą jałowych wymazówek z tworzywa sztucznego lub aluminium są preferowanymi próbkami do nieinwazyjnej diagnostyki mikrobiologicznej grypy u dorosłych2.

Aspirat lub płukanie z nosogardła stanowi alternatywną próbkę, która może być wykorzystana do diagnostyki. Pobranie tego rodzaju próbki jest szczególnie dobrze tolerowane przez dzieci2. Te metody często zapewniają większą ilość materiału komórkowego, co może zwiększyć czułość testów.

Próbki śliny mogą być również wykorzystywane, ale charakteryzują się niższą wydajnością diagnostyczną w porównaniu z wymazami z nosogardła1. Badania wykazały, że próbki śliny analizowane różnymi szybkimi testami diagnostycznymi grypy (RIDTs) mają zmienną skuteczność w porównaniu z tradycyjnymi wymazami z nosogardła3.

Ważne: Wymazy z nosogardła są złotym standardem pobierania próbek do diagnostyki grypy. Prawidłowa technika pobierania musi być podkreślona jako czynnik, który bezpośrednio koreluje z wydajnością diagnostyki mikrobiologicznej.

Technika pobierania wymazów z nosogardła

Prawidłowa technika pobierania wymazów z nosogardła jest kluczowa dla uzyskania wiarygodnych wyników diagnostycznych. Zaleca się stosowanie wymazówek z nylonu flokowanego, poliestru Dacron® lub zakończonych rajonem z elastycznym drutem4.

Podczas pobierania wymazu lekarz wprowadza długą wymazówek głęboko do nozdrza pacjenta (nosogardła) lub wokół ścian nosa. Procedura polega na delikatnym wprowadzeniu wymazówki przez nozdrze do tylnej ściany nosogardła, gdzie pozostawia się ją na kilka sekund, obracając jednocześnie w celu zebrania jak największej ilości materiału komórkowego5.

Test na grypę najczęściej wykonuje się w gabinecie lekarza, szpitalu, klinice pilnej opieki medycznej lub w niektórych aptekach. Dla osób w wieku 2 lat i starszych może być dostępny test, który można wykonać w domu6. Wszystkie testy na grypę wymagają próbki oddechowej, niezależnie od miejsca wykonania.

Wymogi dotyczące wymazówek i materiałów

Nie wszystkie rodzaje wymazówek są odpowiednie do pobierania próbek na grypę. Wymazówki z drewnianymi trzonkami, zakończone bawełną oraz wymazówki z alginianu wapnia są odrzucane przez laboratoria jako nieodpowiednie do testowania4.

Wymazy muszą być transportowane do laboratorium mikrobiologicznego w jałowych probówkach transportowych z pożywką do transportu wirusów. Suche probówki wykorzystywane do transportu próbek do diagnostyki bakteryjnej nie są odpowiednie1. Właściwe medium transportowe zapewnia przeżycie wirusów podczas transportu i przechowywania.

Jeśli pobiera się wymazy z wielu miejsc górnych dróg oddechowych, dopuszczalne jest umieszczenie kilku wymazówek w jednej fiolce z medium VCM lub równoważnym. Każda próbka na grypę A H5 powinna być jednak wysyłana z osobną rekwizycją i transportowana we własnej zapieczętowanej torbie7.

Optymalne okno czasowe pobierania próbek

Wydajność diagnostyki mikrobiologicznej jest odwrotnie proporcjonalna do czasu, który upłynął od początku objawów – im wcześniej pobierzemy próbkę, tym wyższa będzie skuteczność rozpoznania mikrobiologicznego8. Idealne testowanie grypy powinno nastąpić tak szybko, jak to możliwe po wystąpieniu choroby, przy użyciu próbek oddechowych pobranych w ciągu 4 dni od wystąpienia objawów9.

Testowanie na grypę polega na wykrywaniu wirusa (lub jego materiału genetycznego), który jest wydalany w wydzielinach oddechowych osoby zakażonej. Wykrywalny wirus jest zazwyczaj wydalany tylko przez pierwsze kilka dni choroby, dlatego większość testów musi być wykonana w tym okresie10.

W przypadku pacjentów hospitalizowanych z niewydolnością oddechową otrzymujących wentylację mechaniczną, w tym osób prezentujących ciężki stan kliniczny z poprzednim ujemnym wykryciem wirusa w próbce z górnych dróg oddechowych pobranej podczas trwającego epizodu infekcyjnego, należy pobrać próbki z dolnych dróg oddechowych (płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe lub aspirat tchawiczo-oskrzelowy)1.

Optymalne okno czasowe: Najwyższą skuteczność testów uzyskuje się, gdy próbka zostanie pobrana w ciągu pierwszych 4 dni od wystąpienia objawów. Po tym czasie stężenie wirusa w drogach oddechowych znacznie spada, co może prowadzić do fałszywie ujemnych wyników.

Przechowywanie i transport próbek

Właściwe przechowywanie i transport próbek ma kluczowe znaczenie dla zachowania integralności materiału wirusowego. Próbki powinny być przechowywane w temperaturze lodówki i transportowane z użyciem wkładów chłodzących4. Temperatura transportu ma bezpośredni wpływ na stabilność wirusów i może wpływać na wyniki testów.

Płukania i aspiraty powinny być dodawane do równej ilości pożywki VCM. Minimalna objętość próbki to jedna wymazówka lub 1 ml materiału płynnego4. Właściwe proporcje próbki i pożywki transportowej są istotne dla zachowania żywotności wirusów.

Próbki nieprawidłowo przechowywane lub transportowane mogą prowadzić do degradacji materiału wirusowego, co skutkuje fałszywie ujemnymi wynikami nawet przy użyciu czułych testów molekularnych. Dlatego ścisłe przestrzeganie protokołów transportowych jest niezbędne dla wiarygodności diagnostyki.

Próbki nieodpowiednie do diagnostyki grypy

Niektóre rodzaje próbek nie są odpowiednie do rutynowej diagnostyki grypy. Krew, osocze, surowica, mocz, stolec i płyn mózgowo-rdzeniowy nie nadają się do rutynowej diagnostyki infekcji wirusem grypy8. Te materiały biologiczne nie zawierają wystarczającego stężenia wirusa do wiarygodnego wykrycia.

Pojedyncze lub sparowane próbki surowicy do diagnostyki serologicznej są wskazane wyłącznie do celów epidemiologicznych8. Testowanie serologiczne wymaga specjalnego podejścia z próbkami pobranymi w określonych odstępach czasowych i nie jest przydatne w ostrej fazie choroby.

Ważne jest również, aby pamiętać, że próbki pobrane nieprawidłową techniką lub z użyciem nieodpowiednich materiałów mogą być odrzucone przez laboratoria, co opóźnia diagnostykę i może wpłynąć na decyzje terapeutyczne.

Specjalne sytuacje pobierania próbek

W niektórych sytuacjach klinicznych wymagane są specjalne procedury pobierania próbek. U pacjentów hospitalizowanych z podejrzeniem grypy, szczególnie tych w oddziałach intensywnej terapii, może być konieczne pobranie próbek z dolnych dróg oddechowych, jeśli próbki z górnych dróg oddechowych dały wynik ujemny11.

W przypadku podejrzenia infekcji nowym wirusem grypy A pochodzenia zwierzęcego, należy skontaktować się z lokalnymi i stanowymi departamentami zdrowia w celu wykonania RT-PCR dla sezonowych wirusów grypy oraz nowych wirusów grypy A12. Te sytuacje wymagają specjalnych protokołów bezpieczeństwa i diagnostyki.

Pytania i odpowiedzi

Jak długo można przechowywać próbkę przed wysłaniem do laboratorium?

Próbki powinny być wysłane do laboratorium jak najszybciej, najlepiej w ciągu 24-48 godzin. Muszą być przechowywane w temperaturze lodówki (2-8°C) i transportowane z użyciem wkładów chłodzących.

Czy można używać wymazówek z bawełną do pobierania próbek na grypę?

Nie, wymazówki zakończone bawełną, z drewnianymi trzonkami oraz z alginianu wapnia są odrzucane przez laboratoria. Należy używać wymazówek z nylonu flokowanego, poliestru Dacron lub rajonu z elastycznym drutem.

Kiedy najlepiej pobrać próbkę do testu na grypę?

Optymalne okno czasowe to pierwsze 4 dni od wystąpienia objawów, gdy wydalanie wirusa jest najintensywniejsze. Im wcześniej zostanie pobrana próbka, tym wyższa będzie czułość testu.

Czy można pobrać próbkę śliny zamiast wymazu z nosa?

Próbki śliny mogą być wykorzystywane, ale charakteryzują się znacznie niższą wydajnością diagnostyczną w porównaniu z wymazami z nosogardła. Wymazy z nosogardła pozostają złotym standardem.

Reklama
Reklama