Metody wykrywania przeciwciał przeciwko Trichinella

Badania serologiczne stanowią najważniejszą metodę diagnostyczną włośnicy1. Są one szczególnie przydatne w połączeniu z eozynofilią, objawami klinicznymi oraz wywiadem epidemiologicznym, umożliwiając wczesne wdrożenie leczenia1.

Test ELISA jako metoda z wyboru

Najbardziej powszechnie stosowaną metodą diagnostyczną jest test immunoenzymatyczny ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) wykorzystujący antygeny wydzielniczo-wydalnicze Trichinella spiralis2. Test ELISA dla przeciwciał IgG przeciwko Trichinella oferuje znaczące ulepszenia w czułości w porównaniu z powszechnie stosowanymi testami flokulacji bentonitowej (BF) i aglutynacji lateksowej (LA)3.

Pozytywne reakcje są wykrywalne w pewnym momencie podczas infekcji w próbkach surowicy u 80-100% pacjentów z objawową włośnicą2. Badania ELISA z antygenami wydzielniczo-wydalniczymi wykrywają przeciwciała wcześniej niż flokulacja bentonitowa w 25% próbek surowicy od pacjentów z ostrym zakażeniem2.

Zalety testu ELISA: Wysoka czułość i swoistość, możliwość automatyzacji, standaryzowane procedury, szybkość wykonania. Test ELISA jest obecnie rekomendowany przez Międzynarodową Komisję ds. Włośnicy (ICT) jako metoda z wyboru w diagnostyce serologicznej.

Ograniczenia czasowe badań serologicznych

Głównym ograniczeniem badań serologicznych jest opóźniona serokonwersja. Poziomy przeciwciał często nie są wykrywalne aż do 3-5 tygodni po zakażeniu, znacznie po początku choroby w fazie ostrej2. Przeciwciała przeciwko Trichinella spiralis mogą nie być wykrywalne aż do 3 tygodni od początku zakażenia4.

Z tego powodu ujemne wyniki w podejrzanych przypadkach powinny być śledzone przez powtórne badanie po kilku tygodniach4. Należy pobrać wiele próbek surowicy w odstępach kilku tygodni, aby wykazać serokonwersję u pacjentów, których początkowa próbka była ujemna2.

Dynamika przeciwciał w czasie

Poziomy przeciwciał osiągają szczyt w drugim lub trzecim miesiącu po zakażeniu, a następnie powoli spadają przez kilka lat2. Badania ELISA pozostają pozytywne przez dłuższe okresy po zakażeniu niż flokulacja bentonitowa i są reaktywne u większej części osób bez klinicznych dowodów włośnicy2.

Serologia może pozostawać pozytywna przez lata po ustąpieniu objawów klinicznych i może nie być w stanie rozróżnić zakażenia aktywnego, wyleczonego lub nawracającego5.

Próbki ostre i rekonwalescencyjne

Do diagnostyki laboratoryjnej może być wymagana próbka ostra (pobrana wcześnie po wystąpieniu objawów) i rekonwalescencyjna (pobrana 4-12 tygodni później)5. Badanie sparowanych próbek surowicy ostrej i rekonwalescencyjnej zwykle jest diagnostyczne6.

W przypadkach klinicznych, w których istnieje silne podejrzenie kliniczne włośnicy, a wyniki są niejednoznaczne lub słabo pozytywne, próbki surowicy rekonwalescencyjnej wykazujące znaczny wzrost poziomu przeciwciał w czasie mogą być przydatne do potwierdzenia aktywnego zakażenia5.

Interpretacja wyników: Test serologiczny na Trichinella należy traktować jako badanie przesiewowe narażenia na Trichinella. Rozpoznanie włośnicy wymaga zgodnego wywiadu pacjenta i wspierających ustaleń patologicznych. Pozytywny wynik testu ELISA sugeruje obecne zakażenie Trichinella spiralis.

Inne metody serologiczne

Oprócz testu ELISA stosowane są również inne metody serologiczne. Test immunofluorescencji pośredniej (IFAT) z tytrem przesiewowym 1:32 okazał się niezawodny i specyficzny z pozytywnymi mianami około 1:1287.

Wśród technik serologicznych immunofluorescencja i ELISA są najczęściej stosowane. Jednak mogą brakować im czułości i swoistości ze względu na jakość oczyszczenia antygenu8. Antygeny całych larw mogą wykazywać reakcje krzyżowe z innymi nicieniami lub chorobami autoimmunologicznymi, podczas gdy antygeny wydzielniczo-wydalnicze brakuje czułości w pierwszych miesiącach zakażenia8.

Immunoblot jako metoda potwierdzająca

Francuska Wysoka Władza Zdrowia (HAS) oraz Amerykańskie Centrum Kontroli Chorób (CDC) zalecają immunoblot do potwierdzenia serodiagnostyki8. Kilka badań wykazało skuteczność immunoblotu dla wczesnej diagnostyki, umożliwiając szybkie wsparcie pacjentów i ograniczając powikłania związane z zakażeniem8.

Czułość i swoistość testów

Narodowe Centrum Referencyjne ds. Parazytologii (NRCP) podaje czułość 85% i swoistość 93% dla ich testu serologii Trichinella5. Serologia może być ujemna w pierwszych dwóch tygodniach choroby5.

Testy ELISA obejmujące antygeny wydzielniczo-wydalnicze T. spiralis umożliwiają wykrywanie już po 2 tygodniach od zakażenia, osiągając czułość 100% po 50 dniach9. Czułość i swoistość tego testu ELISA dla przeciwciał IgG przeciwko antygenom Trichinella po 4-6 tygodniach od spożycia mięsa powinna być dalej badana9.

Pytania i odpowiedzi

Kiedy najwcześniej można wykryć przeciwciała przeciwko Trichinella?

Przeciwciała przeciwko Trichinella stają się wykrywalne najwcześniej po 2-3 tygodniach od zakażenia, dlatego w pierwszych tygodniach choroby badania serologiczne mogą być ujemne.

Czy jeden test serologiczny wystarcza do rozpoznania włośnicy?

Często nie. Ze względu na opóźnioną serokonwersję zaleca się powtarzanie badań w odstępach tygodniowych oraz wykonanie badań w parze – próbki ostrej i rekonwalescencyjnej.

Jak długo pozostają pozytywne przeciwciała po przebytej włośnicy?

Przeciwciała mogą pozostawać wykrywalne przez lata po przebytym zakażeniu, co może utrudniać rozróżnienie między zakażeniem aktywnym a przebytym.

Czy pozytywny wynik ELISA zawsze oznacza aktywną włośnicę?

Nie zawsze. Test ELISA należy traktować jako badanie przesiewowe. Rozpoznanie wymaga zgodnego wywiadu epidemiologicznego, objawów klinicznych i wspierających wyników innych badań.

Reklama
Reklama