Jak diagnozuje się zakażenie wirusem Zika – testy i procedury

Diagnostyka zakażenia wirusem Zika stanowi istotne wyzwanie ze względu na niespecyficzne objawy choroby, które mogą przypominać inne infekcje wirusowe przenoszone przez komary1. Większość osób zakażonych wirusem Zika nie rozwija objawów, a u tych, u których objawy się pojawiają, są one zazwyczaj łagodne i obejmują wysypkę, gorączkę, zapalenie spojówek, bóle mięśni i stawów1. Ze względu na podobieństwo objawów do innych chorób przenoszonych przez stawonogi, diagnoza zakażenia wirusem Zika wymaga potwierdzenia laboratoryjnego1.

Podstawowe metody diagnostyczne

Diagnostyka zakażenia wirusem Zika opiera się na dwóch głównych metodach: testach molekularnych i serologicznych2. Testy molekularne, szczególnie testy amplifikacji kwasów nukleinowych (NAAT), są preferowaną metodą diagnozy, ponieważ mogą dostarczyć potwierdzonego dowodu infekcji2. Negatywny wynik testu NAAT nie wyklucza jednak niedawnej infekcji wirusem Zika, dlatego w określonych sytuacjach zaleca się testowanie przeciwciał immunoglobuliny M (IgM)2.

Ważne: Testowanie na obecność wirusa Zika powinno być przeprowadzone tak szybko, jak to możliwe, podczas gdy pacjent nadal ma objawy. Opóźnienie w diagnostyce może prowadzić do fałszywie ujemnych wyników, szczególnie w przypadku testów molekularnych.

Testy molekularne RT-PCR

Testy molekularne oparte na technice odwrotnej transkrypcji i reakcji łańcuchowej polimerazy (RT-PCR) są najczęściej stosowaną metodą diagnostyczną w przypadku zakażenia wirusem Zika3. Test RT-PCR charakteryzuje się wysoką specyficznością i czułością dla wirusa Zika4. Najwyższa czułość testów NAAT występuje w pierwszym tygodniu choroby, który charakteryzuje się wysoką wiremią5. Wirus Zika można często wykryć za pomocą NAAT w surowicy w ciągu tygodnia od wystąpienia objawów i do 14 dni w próbkach moczu6.

Testy RT-PCR powinny być wykonywane na surowicy i moczu7. RNA wirusa Zika można wykryć w różnych płynach ustrojowych, w tym we krwi, moczu, płynie owodniowym i ślinie3. Warto zauważyć, że wykrywanie wirusowego RNA w moczu może być przeprowadzone nawet po fazie wiremii i stanowi późną możliwość wykrycia infekcji8. Badania wykazały, że testy RT-PCR moczu były bardziej czułe niż testy surowicy i śliny w pierwszych 3 tygodniach po wystąpieniu objawów9.

Testy serologiczne przeciwciał IgM

Badania serologiczne z wykorzystaniem przeciwciał immunoglobuliny M (IgM) mogą być wykonywane już 7 dni po wystąpieniu objawów10. W późniejszych stadiach infekcji, zazwyczaj w pierwszym tygodniu objawów, organizm zakażonej osoby zaczyna wytwarzać przeciwciała neutralizujące (IgM) przeciwko wirusowi Zika, które następnie można wykorzystać do wykrycia obecności choroby4. Przeciwciała IgM mogą pozostać dodatnie przez okres do 12 tygodni lub dłużej u pacjentów z historią zakażenia wirusem Zika, co utrudnia interpretację niedawnej lub ostrej infekcji10.

Głównym problemem testów serologicznych IgM są przeciwciała krzyżowo reagujące z innymi flawiwirusami, co może utrudnić ostateczne określenie, który flawiwirus jest odpowiedzialny za niedawną infekcję pacjenta2. Fałszywie dodatnie wyniki są częstsze w przypadku testów IgM niż NAAT i mogą wystąpić z powodu niespecyficznej reaktywności lub reaktywności krzyżowej z innymi flawiwirusami2. Szczególnie problematyczna jest reaktywność krzyżowa z wirusem dengi, ponieważ oba wirusy są blisko spokrewnione11.

Test neutralizacji redukcji blaszek (PRNT)

W przypadku obaw dotyczących reaktywności krzyżowej z innymi flawiwirusami, testy neutralizacji redukcji blaszek (PRNT) zapewniają ilościowe miana przeciwciał specyficznych dla wirusa dla dengi, Zika i innych flawiwirusów5. Testy PRNT mogą rozwiązać problem fałszywie dodatnich wyników przeciwciał IgM spowodowanych niespecyficzną reaktywnością i pomóc w identyfikacji wirusa wywołującego infekcję2. Jeśli wyniki testów IgM są dodatnie, wątpliwe lub niekonkluzywne, wykonanie testu PRNT jest niezbędne do potwierdzenia diagnozy12.

Uwaga: Test PRNT z wartością odcięcia 90% i mianem ≥10 przeciwko wirusowi Zika, wraz z ujemnymi testami PRNT przeciwko innym flawiwirusom, potwierdza niedawną infekcję wirusem Zika. Różnicowanie od innych flawiwirusów i późna diagnoza infekcji wirusem Zika po upływie 3 miesięcy od choroby jest możliwa dzięki PRNT.

Wskazania do testowania

Testowanie na obecność wirusa Zika jest zalecane w określonych sytuacjach klinicznych i epidemiologicznych. Lekarze powinni rozważyć infekcję wirusem Zika u każdego pacjenta, który ma lub miał chorobę z wysypką lub inne objawy sugerujące infekcję wirusem Zika, która rozpoczęła się podczas pobytu w kraju lub obszarze z ryzykiem transmisji wirusa Zika, lub w ciągu 2 tygodni od opuszczenia tego kraju13. Testowanie powinno uwzględniać historię podróży, populację narażoną na ryzyko, obecność objawów zgodnych z infekcją wirusem Zika oraz możliwe narażenia niezwiązane z podróżami, na przykład przenoszenie drogą płciową14.

Szczególnie ważne jest testowanie kobiet ciężarnych z możliwym narażeniem na wirusa Zika i objawami choroby wywołanej wirusem Zika, które powinny zostać przebadane w celu zdiagnozowania przyczyny ich objawów Zobacz więcej: Diagnostyka wirusa Zika u kobiet ciężarnych – procedury i wskazania. Bezobjawowe kobiety ciężarne z ciągłym możliwym narażeniem na wirusa Zika powinny otrzymać ofertę testowania NAAT wirusa Zika trzy razy w czasie ciąży12. Rutynowe testowanie na infekcję wirusem Zika nie jest zalecane dla bezobjawowych kobiet ciężarnych15.

Interpretacja wyników testów

Interpretacja wyników testów diagnostycznych wirusa Zika wymaga starannego rozważenia epidemiologii, historii pacjenta i ograniczeń istniejących testów diagnostycznych16. U pacjentów w ciągu 7 dni od wystąpienia objawów, dodatni test NAAT surowicy na obecność Zika sugeruje obecność ostrej infekcji wirusem Zika17. Test NAAT powinien zostać powtórzony na nowo wyekstrahowanym RNA z tej samej próbki, aby wykluczyć fałszywie dodatnie wyniki testów17.

Ujemny wynik testu molekularnego, takiego jak test PCR, oznacza, że prawdopodobnie nie ma infekcji wirusem Zika18. Jednak ze względu na spadek poziomu wiremii w czasie i możliwą niedokładność w zgłaszaniu dat wystąpienia choroby, ujemny wynik RT-PCR nie wyklucza infekcji wirusem Zika19. W przypadku pacjentów z nieokreślonymi wynikami testów przeciwciał IgM, należy przeprowadzić powtórne testy IgM lub potwierdzające testy PRNT17.

Diagnostyka zakażeń wrodzonych

Diagnostyka wrodzonego zakażenia wirusem Zika wymaga szczególnego podejścia Zobacz więcej: Diagnostyka wrodzonego zakażenia wirusem Zika u niemowląt. Testowanie niemowląt z możliwą wrodzoną infekcją wirusem Zika powinno być prowadzone w oparciu o to, czy niemowlę ma nieprawidłowości zgodne z wrodzonym zespołem Zika (np. mikrocefalię, zwapnienia wewnątrzczaszkowe lub inne nieprawidłowości mózgu lub oczu) oraz wyniki testów matki na obecność wirusa Zika20. Dodatni wynik testu rRT-PCR surowicy lub moczu niemowlęcia potwierdza wrodzone zakażenie wirusem Zika21.

Ograniczenia i wyzwania diagnostyczne

Diagnostyka zakażenia wirusem Zika napotyka na szereg ograniczeń i wyzwań. Potwierdzenie infekcji wirusem Zika na podstawie testów diagnostycznych jest trudne ze względu na czułość testów, specyficzność i epidemiologiczną częstość występowania Zika10. Obecnie nie ma komercyjnie dostępnych testów do diagnozy infekcji wirusem Zika, a testowanie odbywa się w wysoce wyspecjalizowanych laboratoriach przy użyciu testów opracowanych przez laboratoria22.

Fałszywie ujemne wyniki testów mogą wystąpić z powodu testowania zbyt wcześnie po infekcji23. Wczesne lub późne testowanie przeciwciał może skutkować fałszywie ujemnym wynikiem z powodu braku rozwoju przeciwciał lub osłabienia odpowiedzi przeciwciał po infekcji10. Z drugiej strony, fałszywie dodatnie wyniki występują, gdy wynik testu jest dodatni dla infekcji wirusem Zika, podczas gdy pacjent faktycznie nie ma tej infekcji23.

Pytania i odpowiedzi

Jakie testy są wykonywane w diagnostyce zakażenia wirusem Zika?

W diagnostyce zakażenia wirusem Zika wykonuje się głównie testy molekularne RT-PCR (wykrywające RNA wirusa) oraz testy serologiczne przeciwciał IgM. Testy RT-PCR są preferowane w pierwszych 14 dniach od wystąpienia objawów, natomiast testy IgM wykonuje się po 7 dniach od wystąpienia objawów.

Czy test na wirusa Zika można wykonać w moczu?

Tak, test RT-PCR na obecność wirusa Zika można wykonać w moczu i jest nawet bardziej czuły niż test z surowicy w pierwszych 3 tygodniach po wystąpieniu objawów. RNA wirusa można wykryć w moczu do 15 dni po wystąpieniu objawów, nawet gdy wiremia już ustąpiła.

Dlaczego testy przeciwciał IgM mogą dawać fałszywe wyniki?

Testy IgM przeciwko wirusowi Zika mogą dawać fałszywie dodatnie wyniki z powodu reaktywności krzyżowej z innymi wirusami z rodziny flawiwirusów, szczególnie z wirusem dengi. Dlatego w przypadku dodatnich wyników IgM często konieczne jest wykonanie testu PRNT w celu potwierdzenia diagnozy.

Kiedy zaleca się testowanie na obecność wirusa Zika?

Testowanie zaleca się u osób z objawami choroby, które podróżowały do obszarów z transmisją wirusa Zika lub miały kontakt seksualny z osobą narażoną na infekcję. Szczególnie ważne jest testowanie kobiet ciężarnych z możliwym narażeniem na wirusa ze względu na ryzyko wad wrodzonych płodu.

Jak długo po wystąpieniu objawów można wykryć wirusa Zika?

Wirusa Zika można wykryć testem RT-PCR w surowicy do 7-14 dni od wystąpienia objawów, natomiast w moczu do 14-15 dni. Przeciwciała IgM można wykryć od 7 dnia po wystąpieniu objawów i mogą być obecne przez 12 tygodni lub dłużej.

Reklama
Reklama