Histologia, szybki test ureazowy i hodowla – metody endoskopowe

Inwazyjne metody diagnostyki zakażenia Helicobacter pylori wymagają wykonania endoskopii górnego odcinka przewodu pokarmowego z pobraniem wycinków błony śluzowej żołądka. Metody te są szczególnie wskazane u pacjentów starszych, z objawami alarmowymi lub gdy istnieje potrzeba oceny stanu błony śluzowej żołądka oraz wykluczenia nowotworów1.

Endoskopia jako podstawa diagnostyki inwazyjnej

Konwencjonalne badanie endoskopowe jest rutynowo wykonywane w celu diagnostyki chorób związanych z H. pylori, takich jak choroba wrzodowa, zanikowe zapalenie żołądka, chłoniak MALT czy rak żołądka. Endoskopia służy również jako narzędzie do pobrania wycinków błony śluzowej żołądka do dalszych badań inwazyjnych, w tym szybkiego testu ureazowego, histologii, hodowli i metod molekularnych2.

Dla uzyskania dokładnej diagnostyki konieczne jest pobranie co najmniej dwóch wycinków z części odźwiernikowej, jednego z kąta żołądka i dwóch wycinków z trzonu żołądka. Część odźwiernikowa jest preferowanym miejscem biopsji do wykrywania zakażenia H. pylori w większości przypadków, ale biopsja z trzonu żołądka z krzywizny większej jest zalecana u pacjentów z zanikiem części odźwiernikowej lub metaplazją jelitową w celu uniknięcia fałszywie ujemnych wyników3.

Badanie histologiczne

Badanie histologiczne jest powszechnie uważane za złoty standard bezpośredniego wykrywania zakażenia H. pylori i było pierwszą metodą stosowaną do identyfikacji tej bakterii. Pozwala ono na wizualizację morfologii żołądka w dowolnym czasie oraz wykrywanie bakterii Gram-ujemnych opornych na kwaśne pH4.

Czułość histologii w wykrywaniu H. pylori wynosi 95%, a swoistość 98%. Jednak dokładność diagnostyczna zależy od badanego obszaru i liczby próbek. Badanie histologiczne wymaga odpowiedniego przygotowania wycinków i doświadczenia patologa w identyfikacji bakterii3.

Ważne: W przypadkach przewlekłego (aktywnego) zapalenia żołądka, w którym H. pylori nie zostaje wykryty metodami histochemicznymi, można zastosować barwienie immunohistochemiczne H. pylori jako test uzupełniający. Jeśli histologia jest prawidłowa, nie należy wykonywać barwienia immunohistochemicznego5.

Szybki test ureazowy

Szybki test ureazowy (RUT – Rapid Urease Test) jest najbardziej użytecznym testem inwazyjnym do diagnostyki zakażenia H. pylori w rutynowej praktyce klinicznej. Jest tani, szybki, łatwy w wykonaniu, wysoce specyficzny i szeroko dostępny. Test wykorzystuje obecność gotowej ureazy wytwarzanej przez bakterie – w pożywce zawierającej mocznik enzym uwalnia amoniak, zwiększając pH i powodując zmianę koloru podłoża2.

Swoistość różnych testów RUT waha się od 95% do 100%, ale ich czułość jest umiarkowana (85-95%). Test wymaga wysokiej gęstości bakterii – w standardowych zestawach komercyjnych wymagane jest co najmniej 10⁴ bakterii w wycinkach żołądka. Najczęstszymi przyczynami fałszywie ujemnych wyników są niedawne stosowanie inhibitorów pompy protonowej oraz obecność metaplazji jelitowej3.

Dostępne komercyjnie testy RUT, takie jak HpFast, CLOTest i HpOne, wykazują swoistość w zakresie od 95% do 100%, ale ich czułość jest umiarkowana. Test RUT jest najlepiej traktowany jako test przesiewowy, a nie jako złoty standard zakażenia H. pylori6.

Hodowla bakteryjna

Hodowla H. pylori z wycinków biopsyjnych żołądka jest metodą wysoce specyficzną, ale mniej czułą. Swoistość metody wynosi 100% przy optymalnych warunkach, a czułość 76-90%. Izolacja H. pylori przeprowadzana jest przez hodowlę wycinków biopsyjnych żołądka z użyciem selektywnych pożywek, takich jak agar Pylori, agar Columbia z krwią końską i dodatkiem antybiotyków7.

Największą zaletą hodowli jest możliwość przeprowadzenia testów wrażliwości na antybiotyki, co jest szczególnie ważne w obszarach geograficznych o wysokim wskaźniku oporności na metronidazol i klarytromycynę. Pozytywna hodowla jest uważana za jedyny prawdziwy złoty standard diagnostyki H. pylori8.

Uwaga: Hodowla wymaga specjalistycznych warunków i poświęconych laboratoriów. Czas oczekiwania na wyniki może wynosić do 10 dni, co ogranicza jej praktyczne zastosowanie w rutynowej diagnostyce. Jest jednak niezbędna w przypadkach niepowodzenia terapii eradykacyjnej1.

Metody molekularne

Od czasu wprowadzenia reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) do wykrywania zakażenia H. pylori, PCR jest szeroko stosowane do diagnostyki bakterii z wycinków biopsyjnych żołądka, śliny, kału, soku żołądkowego i różnych innych próbek. PCR w czasie rzeczywistym okazuje się być bardziej dokładny w porównaniu z innymi technikami wykrywania H. pylori u pacjentów narażonych na działanie inhibitorów pompy protonowej9.

Metody molekularne umożliwiają nie tylko wykrywanie bakterii, ale także przesiewowe badanie wrażliwości na antybiotyki. PCR w czasie rzeczywistym wykazał zdolność do wykrywania zaledwie 10 kopii u dorosłych i dzieci. Zagnieżdżone testy PCR osiągnęły niemal 100% czułość i 100% swoistość w wykrywaniu H. pylori10.

Wskazania do diagnostyki inwazyjnej

Endoskopia z testami opartymi na biopsji jest zwykle wykonywana u pacjentów z bardziej ciężkimi wskazaniami chorobowymi, takimi jak aktywna choroba wrzodowa lub podejrzenie raka żołądka. Obecność objawów alarmowych, stosowanie niesteroidowych leków przeciwzapalnymi, zaawansowany wiek (45-50 lat lub 60 lat), historia stanów przedrakowych lub nadzór z powodu wcześniejszej choroby nowotworowej dyktują konieczność oceny endoskopowej1.

Diagnostyka inwazyjna pozwala lekarzom na bezpośrednie obserwowanie błony śluzowej, pobranie wycinków do badania histologicznego, testu ureazowego, hodowli bakteryjnej i ewentualnie analizy molekularnej. W przypadku braku wskazań do endoskopii odpowiednie są testy nieinwazyjne, takie jak test oddechowy z mocznikiem lub test antygenu w kale1.

Pytania i odpowiedzi

Kiedy jest wskazana endoskopia w diagnostyce H. pylori?

Endoskopia jest wskazana u pacjentów starszych niż 55-60 lat, z objawami alarmowymi (utrata masy ciała, krwawienie, trudności w połykaniu), przy podejrzeniu raka żołądka lub gdy planowana jest ocena stanu błony śluzowej żołądka.

Ile wycinków należy pobrać podczas endoskopii?

Dla dokładnej diagnostyki należy pobrać co najmniej 5 wycinków: dwa z części odźwiernikowej, jeden z kąta żołądka i dwa z trzonu żołądka. To zwiększa szanse wykrycia H. pylori i umożliwia ocenę rozkładu zapalenia.

Czy szybki test ureazowy może być jedyną metodą diagnostyki?

Szybki test ureazowy najlepiej traktować jako test przesiewowy, a nie złoty standard. Fałszywie ujemne wyniki mogą wystąpić przy niskiej gęstości bakterii lub po stosowaniu inhibitorów pompy protonowej. Zaleca się potwierdzenie innymi metodami.

Dlaczego hodowla H. pylori jest ważna mimo niższej czułości?

Hodowla pozwala na testowanie wrażliwości na antybiotyki, co jest kluczowe przy planowaniu terapii eradykacyjnej, szczególnie w przypadkach niepowodzenia leczenia lub w obszarach o wysokiej oporności na antybiotyki.

Reklama
Reklama