Testy laboratoryjne stanowią fundament nowoczesnej diagnostyki gruźlicy, umożliwiając wykrycie zarówno utajonej infekcji, jak i aktywnej postaci choroby. Rozwój metod laboratoryjnych przeszedł długą drogę od pierwszych testów z tuberkuliną wprowadzonych ponad 100 lat temu, po dzisiejsze zaawansowane techniki biologii molekularnej1.
Test skórny z tuberkuliną (TST)
Test skórny z tuberkuliną, znany również jako test Mantoux, pozostaje jednym z najczęściej stosowanych badań przesiewowych w diagnostyce gruźlicy. Polega na śródskórnym podaniu oczyszczonego białkowego pochodnego tuberkuliny (PPD) i ocenie reakcji po 48-72 godzinach2.
Interpretacja wyniku zależy od wielkości stwardnienia oraz czynników ryzyka pacjenta. Reakcja uznawana jest za dodatnią przy stwardnieniu ≥5 mm u osób wysokiego ryzyka (pacjenci HIV-dodatni, kontakt z chorym na gruźlicę), ≥10 mm u osób umiarkowanego ryzyka oraz ≥15 mm u osób niskiego ryzyka3.
Test ma jednak istotne ograniczenia. Może dawać fałszywie dodatnie wyniki u osób szczepionych BCG lub zakażonych atypowymi mykobakteriami, oraz fałszywie ujemne u osób z osłabioną odpornością immunologiczną. Dodatkowo wymaga dwóch wizyt pacjenta – jednej w celu założenia testu i drugiej do odczytania wyniku4.
Testy uwalniania interferonu gamma (IGRA)
Testy IGRA zostały opracowane jako alternatywa dla testu skórnego, mierząc produkcję interferonu gamma przez limfocyty T po stymulacji specyficznymi antygenami Mycobacterium tuberculosis. Dostępne są dwa główne testy komercyjne: QuantiFERON-TB Gold Plus oraz T-SPOT.TB5.
Główne zalety testów IGRA to: jednokrotna wizyta pacjenta, brak wpływu szczepienia BCG na wynik, większa specyficzność niż TST oraz obiektywny odczyt wyniku. Testy te są szczególnie zalecane dla osób szczepionych BCG, pracowników służby zdrowia oraz osób z osłabioną odpornością immunologiczną5.
Czułość testów IGRA wynosi 80-90%, a specyficzność przekracza 95% w diagnostyce utajonej infekcji gruźliczej. Jednak podobnie jak TST, testy IGRA nie mogą rozróżnić między utajoną infekcją a aktywną chorobą6.
Mikroskopia plwociny
Mikroskopia plwociny pod kątem prątków kwasoopornych (AFB) pozostaje podstawowym badaniem w diagnostyce gruźlicy płucnej, szczególnie w krajach o ograniczonych zasobach. Badanie polega na barwieniu preparatu plwociny metodą Ziehl-Neelsena i obserwacji pod mikroskopem7.
Tradycyjna mikroskopia świetlna ma czułość około 60-70% u pacjentów z dodatnią hodowlą, wymagając obecności co najmniej 5000-10000 prątków w 1 ml plwociny dla uzyskania dodatniego wyniku. Mikroskopia fluorescencyjna z zastosowaniem diod LED zwiększa czułość o około 10% w porównaniu z konwencjonalną mikroskopią8.
WHO zaleca badanie dwóch próbek plwociny, co pozwala wykryć 95-98% przypadków z dodatnim wymazem. Pierwsza próbka ma czułość około 53,8%, druga zwiększa czułość o 11,1%, a trzecia tylko o dodatkowe 2-5%9.
Hodowla prątków gruźlicy
Hodowla pozostaje złotym standardem diagnostyki gruźlicy, będąc najbardziej czułą metodą wykrywania Mycobacterium tuberculosis. Pozwala na wykrycie zaledwie 10-100 prątków w 1 ml próbki oraz umożliwia oznaczanie wrażliwości na leki przeciwgruźlicze10.
Stosuje się dwa typy podłoży hodowlanych: stałe (jak Löwenstein-Jensen) i płynne (jak MGIT 960). Hodowla na podłożu stałym trwa zazwyczaj 2-8 tygodni, podczas gdy systemy płynne mogą dać wynik w ciągu kilku dni do 2 tygodni. Kombinacja obu metod zwiększa ogólną czułość do 87,7-89,7%11.
Wszystkie dodatnie hodowle muszą być poddane testom identyfikacyjnym w celu potwierdzenia, że izolat należy do kompleksu Mycobacterium tuberculosis, oraz testom wrażliwości na leki przeciwgruźlicze12.
Testy amplifikacji kwasów nukleinowych (NAAT)
Testy molekularne NAAT zrewolucjonizowały diagnostykę gruźlicy, oferując szybkie i dokładne wykrywanie DNA lub RNA Mycobacterium tuberculosis. Najpopularniejszym testem jest Xpert MTB/RIF, który może wykryć gruźlicę i oporność na ryfampicynę w ciągu 2 godzin13.
Czułość testów NAAT wynosi około 95-96% dla próbek z dodatnim wymazem AFB i 50-80% dla próbek z ujemnym wymazem. Specyficzność osiąga 98-99%. WHO zaleca wykonywanie testu NAAT na co najmniej jednej próbce oddechowej u każdego pacjenta z podejrzeniem gruźlicy płucnej14.
Nowsza wersja Xpert Ultra ma zwiększoną czułość, szczególnie dla próbek z małą liczbą prątków, z granicą wykrywalności 15,6 CFU/ml w porównaniu z 112,6 CFU/ml dla standardowego Xpert MTB/RIF15.
Testy wykrywania lipoarabinomannan (LAM)
Test wykrywający lipoarabinanman (LAM) w moczu jest punktowym testem diagnostycznym szczególnie przydatnym u pacjentów zakażonych HIV. LAM jest glikolipidem ściennym mykobakterium, który może być wykrywany w moczu pacjentów z aktywną gruźlicą16.
WHO zaleca stosowanie testu LF-LAM u pacjentów HIV-dodatnich z liczbą komórek CD4 poniżej 200/mm³ lub u pacjentów w ciężkim stanie. Czułość testu wynosi 57-64%, ale jest wyższa u pacjentów z niską liczbą CD417.
Zaletą testu LAM jest łatwość pobrania materiału (mocz), szybkość wykonania (około 25 minut) oraz możliwość stosowania w warunkach ambulatoryjnych bez potrzeby wyspecjalizowanego sprzętu laboratoryjnego18.
Interpretacja wyników i strategie diagnostyczne
Prawidłowa interpretacja testów laboratoryjnych wymaga uwzględnienia prawdopodobieństwa przed testem, stanu immunologicznego pacjenta, wieku oraz czynników ryzyka. Pojedynczy test rzadko dostarcza definitywnej odpowiedzi, dlatego zaleca się stosowanie kombinacji różnych metod diagnostycznych19.
W przypadku podejrzenia gruźlicy płucnej zalecany algorytm obejmuje: mikroskopię AFB, testy NAAT oraz hodowlę z jednoczesnym badaniem radiologicznym klatki piersiowej. Dla gruźlicy pozapłucnej konieczne może być pobranie materiału z odpowiednich miejsc anatomicznych oraz wykonanie dodatkowych badań biochemicznych płynów ustrojowych20.






















