Test heterofili, powszechnie nazywany testem monospot, stanowi jeden z najczęściej stosowanych testów laboratoryjnych w diagnostyce mononukleozy zakaźnej1. Jest to test krwi przeznaczony do wykrywania przeciwciał heterofilnych w organizmie – wyspecjalizowanych białek produkowanych przez układ odpornościowy w odpowiedzi na określone zakażenia1.
Mechanizm działania testu monospot
Test heterofili działa poprzez aglutynację (zlepianie się) czerwonych krwinek z surowicy pacjenta1. Test monospot ocenia aglutynację końskich czerwonych krwinek po wstępnej absorpcji surowicy komórkami świnki morskiej2. Jeśli przeciwciała heterofilne są wykryte, zwykle wskazuje to na aktywne lub niedawne zakażenie wirusem Epstein-Barr1.
Przeciwciała heterofilne mogą być obecne już od czwartego dnia choroby, a do dwudziestego pierwszego dnia choroby 90% pacjentów będzie wykazywać pozytywny wynik testu3. Reagent aglutynuje się po zmieszaniu z surowicą zawierającą przeciwciała heterofilne4. Test wykorzystuje technikę lateksowej aglutynacji i jest testem szybkim, dostarczającym wyników w ciągu godziny5.
Dokładność i parametry diagnostyczne
Test heterofili charakteryzuje się czułością 87% i swoistością 91% według przeglądu systematycznego5. W przypadku pacjentów z objawami test ma wysoką wartość predykcyjną dodatnią wynoszącą około 95%, co oznacza, że pozytywny wynik silnie sugeruje obecność mononukleozy6. U pacjentów z objawami pozytywny wynik testu monospot jest 85% czuły i 94% specyficzny dla mononukleozy zakaźnej7.
Pacjenci z mononukleozą zakaźną zwykle (85-90%) mają przeciwciała heterofilne8. Po mononukleozie wywołanej EBV 70-90% pacjentów produkuje przeciwciała heterofilne9. Pozytywność zwiększa się w pierwszych sześciu tygodniach choroby, dlatego wyniki testu przeciwciał heterofilnych mogą być ujemne we wczesnym przebiegu mononukleozy EBV10.
Ograniczenia i wyniki fałszywe
Test monospot nie jest zalecany do ogólnego użytku przez CDC ze względu na słabą dokładność11. Przeciwciała wykrywane przez monospot mogą być powodowane przez inne stany niż mononukleoza zakaźna12. W najlepszym przypadku test może wskazywać, że osoba ma typowy przypadek mononukleozy zakaźnej, ale nie potwierdza obecności zakażenia EBV12.
Wyniki mogą być fałszywie ujemne w 25% przypadków w pierwszym tygodniu, 5-10% przypadków w drugim tygodniu i 5% przypadków w trzecim tygodniu choroby8. Fałszywie ujemne wyniki występują również u dzieci poniżej 5 roku życia13. Test jest znacznie mniej wiarygodny i często ujemny u małych dzieci z mononukleozą zakaźną14.
Fałszywie dodatnie wyniki mogą wystąpić w chorobach autoimmunologicznych, toksoplazmozą, różyczką, chłoniaku, zakażeniu cytomegalowirusem oraz ostrym HIV13. Około 25% osób z mononukleozą nie produkuje przeciwciał heterofilnych i będzie mieć ujemny test monospot15. Organizm wytwarza te same przeciwciała wykrywane przez monospot przeciwko wielu zakażeniom, nie tylko EBV16.
Interpretacja wyników
Pozytywny wynik wskazuje na obecność przeciwciał heterofilnych we krwi, co silnie sugeruje mononukleozę zakaźną6. Pozytywny wynik testu, wraz z objawami pacjenta, służy do postawienia diagnozy mononukleozy zakaźnej17. Pozytywny wynik w teście przesiewowym w kierunku mononukleozy zakaźnej, wraz z objawami mononukleozy, stanowi podstawę diagnozy18.
Ujemny wynik oznacza, że przeciwciała heterofilne nie zostały wykryte we krwi6. Ujemny wynik może wskazywać, że pacjent nie ma mononukleozy zakaźnej, jednak test nie zawsze jest dokładny i w określonych sytuacjach pacjenci mogą potrzebować dodatkowych badań17. Jeśli wyniki przeciwciał heterofilnych są ujemne do sześciu tygodni od początku choroby, należy zbadać przeciwciała specyficzne dla EBV19.
Wskazania do wykonania testu
Test monospot może być zlecony, gdy osoba ma objawy, które lekarz podejrzewa, że są spowodowane mononukleozą zakaźną20. Wskazania obejmują obecność gorączki, bólu gardła, powiększonych węzłów chłonnych, zmęczenia, bólu głowy, wysypki, powiększonej wątroby, śledziony lub obu oraz powiększonych migdałów21.
Test jest szczególnie przydatny jako badanie przesiewowe, ponieważ tylko 70-80% przypadków mononukleozy produkuje przeciwciała heterofilne18. Jest to szybki i łatwy test (wyniki powinny być dostępne po jednym dniu), ale nie jest w 100% specyficzny dla mononukleozy zakaźnej18. Może być potrzebne więcej badań, aby potwierdzić mononukleozę i upewnić się, że objawy nie są spowodowane przez inną chorobę18.
Alternatywy dla testu monospot
W przypadku ujemnego wyniku testu monospot, ale utrzymującego się wysokiego podejrzenia klinicznego, zaleca się wykonanie testów przeciwciał specyficznych dla EBV22. Testy przeciwciał VCA IgG i IgM mogą być pomocne, jeśli wyniki testów przeciwciał heterofilnych są ujemne, ale podejrzenie kliniczne jest wysokie22.
Jeśli test monospot jest ujemny, a wynik fałszywie ujemny jest możliwy ze względu na zbyt wczesne testowanie po zakażeniu, lekarz może powtórzyć test w późniejszym czasie17. Inne szybkie testy diagnostyczne wykorzystują techniki ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), których czułość i swoistość szybkich zestawów zbliża się do 85-100%23. Alternatywnym testem do potwierdzenia diagnozy jest specyficzny test przeciwciał krwi dla EBV14.

















